固相萃取仪的使用：1.活化
固相萃取仪萃取前先用充满小柱的溶剂冲洗小柱或用5-10ml溶剂冲洗滤膜使SPE填料保持湿润，因为填料干燥会降低样品保留值，而各小柱的干燥程度不一，也会影响回收率的重现性。先用甲醇等水溶性有机溶剂冲洗填料，因为甲醇能润湿吸附剂表面，并渗透到非极性的硅胶键合相中，使硅胶更容易被水润湿；然后再加入水或缓冲液冲洗，创造和样品溶剂相容的环境并提高回收率。
2.上样
①用0.1mol/L酸或碱调节，使pH=9，离心取上层液萃取；
②用甲醇、乙腈等沉淀蛋白质后取上清液，以水或缓冲液稀释后萃取；
③用酸或无机盐沉淀蛋白质后取上清液，调节pH值后萃取；
④超声15min后加入水、缓冲液，取上清液萃取。流速应控制为1ml/min，流速快不利于待测物与固定相结合。
3.淋洗
反相SPE的清洗溶剂多为水或缓冲液，可在清洗液中加入少量有机溶剂、无机盐或调节pH值。加入小柱的清洗液应不超过一个小柱的容积，而SPE滤膜为5-10ml。
4.洗脱
应选用5-10ml离子强度较弱但能洗下待测物的洗脱溶剂。若需较高灵敏度，则可先将洗脱液挥干后，再用流动相重组残留物后进样。体内样品洗脱后多含有水，可选用冷冻干燥法。保留能力较弱的SPE填料可用小体积、较弱的洗脱液洗下待测物，再用极性较强的HPLC分析柱如C18柱分析洗脱物。
更新时间：2022-07-05
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